Указом от 29 ноября 1733 года крепость включили в строившуюся на грани­цах Новороссии Украинскую оборо­нительную линию. Создавался плац­дарм для войны с Турцией, закре­пившейся в дельте Дона. Здесь, в крепости, в марте 1736 года нача­лась концентрация частей регулярной армии, по Дону подходили военные и транспортные суда с артиллерией и боеприпасами. В 1737 году под командованием графа Миниха вой­ска двинулись к Азову, и после че­тырехмесячной осады город был взят штурмом. Сделан был шаг к тому, чтобы окончательно освободить юж­ные русские земли от турок.

В течение тридцати лет Аннинская крепость была самым южным рус­ским форпостом страны. В 40-х годах XVIII века через крепость шел почтовый тракт из Астрахани на Воронеж.

Русско-турецкая война 1735— 1739 годов показала, что весь объ­ем задач на юге крепость не могла выполнить. Здесь сказывались удаленность крепости от Азовского по­бережья, и заболоченность местно­сти. В 1761 году «оставлена сия кре­пость впусте, с тем, однако же, чтоб не вовсе ея разорить, а иметь бы в ведомстве нынешней крепости (Ди­митрия Ростовского) за полевое укрепление».

Сейчас это, пожалуй, единственный на Юге стра­ны столь хорошо сохранившийся па­мятник военно-оборонительного зод­чества XVIII века таких размеров. Аннинская крепость — иллюстра­ция одного из этапов в развитии во­енно-инженерного искусства. На Дону сохранился и памятник, с которого началось это новое направ­ление в создании усовершенство­ванной бастионной Системы в конце XVII века — Павловская крепость.

Находясь на валах крепости, труд­но уловить общую планировку «на­чертания» ее укреплений. Но у любого из бастионов легко оценить гранди­озность замысла и огромный объем работ, выполненных русскими солда­тами и инженерами в два года.